Becaria posdoctoral de CONICET / Profesor Asistente UNC
Director: Mario Guido
E-Mail: pwagner@unc.edu.ar
Tema de Tesis
Regulación circadiana del metabolismo lipídico y expresión de genes reloj en células tumorales. Estudios in vivo y en cultivos celulares
El sistema circadiano regula temporalmente la fisiología del organismo y está conformado por osciladores distribuidos en distintos órganos y tejidos. Estos relojes generan ritmos autosostenidos, se sincronizan con señales ambientales y presentarían un estrecho control sobre el metabolismo celular (Bass 2012). Más aun, la disrupción de los ritmos diarios podría tener severos efectos sobre la salud (síndrome metabólico, obesidad, alteraciones en el sueño) y aumentar el riesgo al cáncer (Lathi et al., 2012). Nuestro laboratorio ha investigado la regulación circadiana del metabolismo de glicerofosfolípidos (GFLs) en células retinales (Guido et al, 2010), en hígado (Gorné et al., 2014) y en cultivos de fibroblastos NIH 3T3 inmortalizados (Márquez et al., 2004; Acosta et al., 2013). Estas y otras líneas celulares, una vez sincronizadas, presentan oscilaciones circadianas en la expresión génica (Balsalobre et al., 1998) y en la síntesis de GFLs mediante un mecanismo dependiente de la expresión de la proteína PER1. La fosfatidiletanolamina (PE) es uno de los GFLs más abundantes en las membranas eucariotas sintetizado por la vía de Kennedy a partir de etanolamina. Las enzimas regulatorias en esta vía son la etanolamina kinasa (EK) y la citidiltransferasa (ECT) (enzima limitante). Poco se conoce sobre el funcionamiento de estos relojes en la regulación del metabolismo lipídico en células cancerígenas. Para abordar estos aspectos, se utilizarán: 1) líneas tumorales humanas: T98G (glioblastoma de cerebro) y HepG2 (carcinoma de hígado) y sus controles (cultivos primarios de glía o hepatocitos mamíferos) y 2) tumores inducidos en nervios periféricos de ratón por inóculo de células 530 (gliomas, laboratorio Dra. BL Caputto). El objetivo general es investigar la regulación temporal de la biosíntesis de GFLs en cultivos tumorales sujetos a arresto parcial o proliferación, post sincronización, y en tumores inducidos en ratones a distintos tiempos (día/noche). Los objetivos específicos investigarán en líneas tumorales sincronizadas, y tumores (día/noche): a) la presencia de genes reloj (Bmal1, Per1, Per2, Cry1, Cry2,) y posible ritmicidad; y b) la marcación de GFLs y de PE, expresión y actividad de las enzimas EK y ECT, a distintos tiempos y en las condiciones experimentales mencionadas. Estos estudios permitirán conocer si existe un control circadiano del metabolismo lipídico en células tumorales y si las mismas conservan intacto su mecanismo.